Sensore di Flussu Microfluidicu Bidirezionale FLUIGENT ODROPSEQFPCK

Specificazioni di u produttu

• Nome di u produttu: DropSeq Fluidic
• Numero di parte: ODROPSEQFPCK
• Versione: Ottobre 20

Informazione di u produttu

U protocolu DropSeq Fluidic hà per scopu di spiegà cumu replicà a parte fluidica di u protocolu Macosco DropSeq aduprendu i cuntrolli di pressione Fluigent invece di e pompe à siringa. L'avanzamentutagA caratteristica principale di i regulatori di pressione hè a so rapidità di risposta, chì permette a generazione rapida di gocce. U cuntrollu di a pressione permette di pruduce gocce di a dimensione ghjusta in menu di dui secondi. Inoltre, i sensori di flussu permettenu un cuntrollu direttu di u flussu, imitendu u funziunamentu di una pompa à siringa.

Materiali è Metodi:
Per implementà stu protocolu, avete bisognu di i seguenti materiali:

• Pacchettu DropSeq
• Pruduttu esternu (opzionale)
• Diversi cumpunenti cum'è elencati in a descrizzione di u cuntenutu

Istruzzioni per l'usu di u produttu

Preparazione di u dispusitivu per un novu esperimentu:

1. Verificate i dispusitivi PDMS prima di l'usu.
2. Sbucciate una piccula zona di a pellicola chì copre i generatori.
3. Aghjunghjite una goccia di dSURFan o di un tensioattivu alternativu in a presa di corrente è aspettate.
4. Cunnette u tubu à u dispusitivu microfluidicu.
5. Applicate una piccula pressione cù Flow-EZ.
6. Aspettate chì u fluidu esca da l'entrate/uscite è rimette a pressione à 0 mbar.
7. Accendete l'agitatori vortex è applicate pressione à i reservoir finu à chì u fluidu esce.
8. Cunnette tutti i tubi secondu u schema.

Lanciamentu di un esperimentu:
Dopu à una cunnessione curretta, cuminciate una corsa DropSeq applicendu pressioni à diversi reservoirs cù u software AiO. E gocce devenu furmassi in pochi secondi.

Cuntrollu di u flussu:
Cù una unità di flussu, aduprate u Flow-EZ cum'è una pompa di siringa. U software AiO permette cumandamenti di velocità di flussu, aghjustendu e pressioni in cunsequenza. Salvate a cunfigurazione di pressione una volta impostata.

OBJECTIVE DI U PROTOCOLLU

• Stu protocolu hà per scopu di spiegà cumu riproduce a parte fluida di u protocolu Macosco DropSeq aduprendu i cuntrolli di pressione Fluigent invece di e pompe à siringa.
• U vantaghju principaletagUna di e caratteristiche principali di i regulatori di pressione hè a rapidità di risposta. Cù u cuntrollu di a pressione, e gocce di a dimensione ghjusta ponu esse generate in menu di dui secondi. Cù sensori di flussu, hè ancu pussibule aduprà u cuntrollu di flussu direttu per aduprà u regulatore di pressione in u listessu modu chì si aduprerebbe una pompa à siringa.

MATERIALI È METODI

Per realizà stu protocolu, avete bisognu di u seguente materiale:

Descrizzione di u cuntenutu di riferimentu di u produttu
Pacchettu DropSeq	ODROPSEQFPCK	3 *FlowEZ 2 bar
		1 * Link
		1 *Pcap 15 ml
		2 *Pcap 2ml
		2 * Unità di flussu M
		1 *Unità di flussu L
		Chip PDMS DropSeq chì cuntene 23 disinni
		Kit di fornitura Flow EZ
		2 * Kit di flussu bassu
		Kit di flussu elevatu
		Kit di cunnessione è tubi DropSeq
Pruduttu opzionale	IMCA001	Microscopiu digitale à alta velocità
	DR-RE-SU-12	12 ml dSURF
	FLPG +	Fonte di pressione
Pruduttu esternu	Perle cù codice à barre	Perle cù codice à barre: Chemgenes CSO-2011*
	Mixer à vortex	Miscelatore vortex: Sigma, Fisher Scientific…

U primu passu hè di ricreà a seguente cunfigurazione.

U PROTOCOLU

Preparazione di u dispusitivu per un novu esperimentu
Quandu si principia un novu esperimentu, hè cunsigliatu di caccià tutta l'aria da u chip è da u tubu. Per quessa, seguitate i passi seguenti:

1. Prima di utilizà i dispusitivi PDMS, verificate attentamente i generatori. Sè avete qualchì preoccupazione / quistione, ùn esitate micca à cuntattateci.
2. Ùn sbuchjate micca cumpletamente a pellicola à l'iniziu: Tagliate a piccula zona per ogni generatore per l'usu. (Tutti i nostri chip PDMS sò cuparti da una pellicola sigillante, una pellicola sigillante porosa idrofobica cù adesivo di qualità medica per piastre di cultura tissutale.)
3. Aghjunghjite una goccia di dSURF (o oliu fluoruratu cù un altru tensioattivu s'è vo ùn aduprate micca u dSURF) in a surtita prima di principià l'esperimentu è aspettate uni pochi di minuti. Per piacè aumentate i tassi di flussu di l'oliu F è di e fasi acquose passu à passu. Evitate di saltà da 0 à ~14 mL/h (o tassi di flussu massimi) direttamente.
4. Cunnette u tubu dSURF (o l'oliu fluoruratu cù un altru tensioattivu s'ellu ùn si usa micca u dSURF) à u portu d'entrata drittu di u dispusitivu microfluidicu.
5. Applicate una piccula pressione cù u Flow-EZ (circa 200 mbar devenu esse abbastanza)
6. Aspettate finu à chì vedete un pocu d'oliu chì esce da l'entrate/uscite aperte di u chip è poi rimette a pressione à 0 mbar.
7. Accendete l'agitatori vortex è applicate una piccula pressione à l'altri dui reservoir finu à chì vedete una piccula goccia di fluidu chì esce da a fine di u tubu.
8. Fermate tutte e pressioni è cunnette tutti i tubi secondu u schema.

Lancià un esperimentu
Una volta chì u dispusitivu hè cunnessu currettamente, l'iniziu di una corsa DropSeq hè assai veloce. Basta à applicà e seguenti pressioni à i diversi reservoirs cù u software AiO. E gocce devenu cumparisce in menu di uni pochi secondi.

• P (Oliu) = 1300 mbar
• P (Cellule) = 540 mbar
• P (Perle) = 580 mbar
  Queste pressioni devenu generà gocce di circa 90-130 µm, ciò chì porta à tassi d'incapsulazione da 1 à 3).
  Cunsigliu:
  Cù u software AiO, e cunfigurazioni di pressione ponu esse facilmente salvate. Questu permette di stabilisce tutte e pressioni à un puntu datu à u listessu tempu.

Cuntrollu di u flussu

• Cumbinatu cù una unità di flussu, u Flow-EZ pò esse adupratu esattamente cum'è una pompa à siringa. U software AiO permette cumandamenti di flussu. Un ciclu di feedback nantu à u flussu aghjusta tandu e pressioni à u valore ghjustu. Sta tecnica pò esse utile per valutà e pressioni necessarie per l'esperimentu.
• Una volta in u statu currettu, a cunfigurazione di pressione pò esse salvata.

  

Per più infurmazioni, cuntattateci per email: contact@fluigent.com o cunsultate u nostru websitu: www.fluigent.com.

FAQ

Cù chì rapidità si ponu generà gocce cù i cuntrolli di pressione ?

Gocce di a dimensione ghjusta ponu esse generate in menu di dui secondi aduprendu cuntrolli di pressione.

Possu aduprà u cuntrollu di flussu direttu cù stu protocolu?

Iè, i sensori di flussu permettenu un cuntrollu direttu di u flussu simile à l'usu di una pompa à siringa.

Documenti / Risorse

Sensore di Flussu Microfluidicu Bidirezionale FLUIGENT ODROPSEQFPCK [pdfManuale d'istruzzioni ODROPSEQFPCK, IMCA001, DR-RE-SU-12, ODROPSEQFPCK Sensore di Flussu Microfluidicu Bidirezionale, ODROPSEQFPCK, Sensore di Flussu Microfluidicu Bidirezionale, Sensore di Flussu Microfluidicu, Sensore di Flussu

Referenze

• Manuale d'usu